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影响ELISA试剂盒曲线问题的原因有哪些?
发布时间:2020-12-10   点击次数:78次
  Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。
  影响ELISA试剂盒曲线问题的原因有哪些?
  标准曲线做的好与坏会直接影响到实验的结果,甚至是关系到实验的成败。我公司技术人员在处理售后的问题中,有不少科研朋友咨询曲线的问题,随后,技术人员将影响ELISA试剂盒曲线问题的原因做了总结:
  一、OD值不正常的可能原因是:
  1、试剂盒未回温,试剂盒回温到25℃;
  2、温度控制不好,控制正确温度;
  3、孵育时间不准确,控制孵育时间;
  4、洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增 加,洗涤4-5次,每孔250ul,然后拍干;
  5、阳光直射,对着风直接吹,避风避;
  6、酶标仪的波长错误,酶标仪的波长450nm;
  7、抗体的稀释错误,正确的稀释抗体;
  8、水质问题,用娃哈哈矿泉水代替。
  二、白板的可能原因是:
  1、洗涤液配制错误,正确的配制洗涤液;
  2、少加液体(错加液体),正确的步骤加液体。
  三、无梯度可能原因是:
  1、标准品也污染,换标准品点板;
  2、OD值不正常,控制温度时间在做一次;
  3、人为点板,不要点板。
  四 线性不好可能原因是:OD值不正常,控制温度时间在做一次。
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