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ELISA检测试剂盒做标准曲线样品检测时需要注意什么
发布时间:2020-09-25   点击次数:52次
  人蛋白ELISA检测试剂盒做标准曲线样品检测时有几个问题需要注意
  1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。
  2、采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度,这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。
  3、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度,并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度,即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内,包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线,尽量要使实验样品的浓度在中间坡度zui陡段,即曲线几乎成直线的范围内。4、检测标准样品时,应按浓度递增顺序进行,以减少高浓度对低浓度的影响,提高准确性。
  5、标准曲线的样品数一般为7个点,但至少要保证有5个点。
  6、做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动,但一般来说,相关系数R至少要大于0.98,对于有些实验,至少要0.99甚至是0.999.
  人蛋白ELISA检测试剂盒的基本原则有三:
  (1)抗原或抗体的物理吸附到固相载体,可以是蛋白质与聚苯乙烯表面吸附的疏水性部分之间的相互作用,并人蛋白ELISA检测试剂盒保持其免疫活性;
  (2)抗原或抗体酶结合物可以通过然而人蛋白ELISA检测试剂盒酶共价键连接,这种酶结合物仍能保持其免疫和大鼠ELISA试剂盒酶的活性;
  (3)酶结合物与相应的抗原或抗体试剂盒,以确定是否免疫反应是根据底物显色反应的增加,和显色反应深度成正比样品的相应抗原或抗体的量,因此,可以按显色底物水平显示测试结果。
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