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把ELISA试剂盒从冷藏环境中取出应如何处理
发布时间:2020-03-17   点击次数:150次
   ELISA试剂盒的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
  ELISA试剂盒可以用于:(1)检测大分子抗原和特异性抗体等;(2)具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。
  ELISA试剂盒实验中的血清需采用血管收集血液,室温血液自然凝固30分钟,1000xg离心15分钟左右,收集上清,分装后,标好号,-20°C或-80°C保存。运输是用干冰。
  把ELISA试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。对于一个旨在分离CD4阳性T的试剂盒来说,操作流程主要有以下几步。首先,将样品与anti-CD4抗体包被的磁珠共同孵育,使抗体与CD4+T结合。然后洗去不需要的非目标(即不表达CD4的),留下磁珠-抗体-复合物。将上述复合物与能结合anti-CD4抗体的二抗一起孵育胞,形成磁珠-抗体-二抗复合物。我们可以用磁铁去除这种磁珠-抗体-二抗复合物,而所有的CD4+细胞留在上清中。zui后,只需将上清转移就可以进行下游研究了。
  ELISA法由于操作简单,已被广泛应用,今天我们就来谈谈ELISA试剂盒需掌握的要点有哪些?今天给大家带来几点很有必要掌握的,跟着小编一起来看看!
  1.在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
  2.小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。请注意在吸取标本/标准品,酶结合物或底物时,第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的 “预孵育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。
  3.试剂盒保存:部分试剂保存于-20℃,部分试剂保存于2-8℃,具体以标签上的标示为准。
  4.浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
  5.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
  6.所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
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