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做小鼠免疫球蛋白M实验中,需要注意什么?
发布时间:2020-03-16   点击次数:312次

小鼠免疫球蛋白M(IgM)酶联免疫分析

试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围:0.1ng/ml - 4ng/ml

使用目的:

本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白 M(IgM)含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中小鼠免疫球蛋白 M(IgM)水平。用纯化的抗原包

被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入免疫球蛋白 M(IgM),再与 HRP 标记

的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB

HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中

的免疫球蛋白 M(IgM)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标

准曲线计算样品中小鼠免疫球蛋白 M(IgM)浓度。

计算

以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的

OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出

标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

注意事项

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未

用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间

控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD

值大于标准品孔D一孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,

计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

保存条件及有效期

1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6 个月

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