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哪些做ELISA实验时常常存在脑子里的疑问
发布时间:2019-11-26   点击次数:212次
   哪些做ELISA实验时常常存在脑子里的疑问
  客户常见问题;
  1,待测收费标准 ?
  答:凡是在本公司购买都是免费待测的。
  2:不同批号的可以一起用么?
  答:不同批号的是不可以混用的
  3 ELISA实验反应时间不同是由什么决定的?
  答:抗原与抗体、抗体与酶标抗体反应一般在37℃ 2h~3h达到高峰。时间太短,敏感性下降,时间太长,吸附的抗原或复合物(在这个温度下)可能脱落。酶底物反应时间的确定:一般采用15min~30min~45min。也可以标准阳性血清为准,随时测定其OD值,当达到规定的OD值时,即终止反应
  。
  4显色淡,灵敏度偏低可能原因及解决方法?
  我们在做实验时,常会遇到度偏低的问题,以下是根据不同问题可能原因及其防止方法总结,仅供参考:
  可能原因及防止方法:
  1.孵育反应时间不足
  定时钟准确定时
  2.洗涤时冲击力太大,洗涤液浸泡时间太长,洗涤次数增加
  减少洗涤冲击力,按说明书要求保留洗涤时间,准确记住洗涤次数
  3.显色剂滴加量不足或顺序颠倒,或混合后加入
  滴加显色液时,滴瓶垂直向下,持力均匀,滴速不宜过快,先加显色剂 A,反加显色剂B,不可将A、B液混合后加入
  4.显色剂反应时间不足
  准确定时
  5.蒸馏水水质有问题
  测定蒸馏水配制试剂对酶免疫法的影响
  6.试剂盒在运输途中时间太长,温度太高
  试剂盒置保温箱内运输,并放足够数量的冰块,尽量缩短运输时间
  7.试剂、样品用前未能平衡
  用前试剂、样品置室温平衡 30分钟左右。
  8.样品和NaN 3 防腐,抑制了酶的反应
  样品不能加 NaN 3 防腐
  9.试剂盒超过有效期
  超过效期试剂盒不要使用
  10.试剂开启时间过长长菌
  试剂开启后请尽量在短时间内用完
  11.移液器吸量不足,移液抽吸排放太快,吸头内壁挂液太多或内壁不清洁
  校正移液器,吸头要配套,每次装吸头要吻合紧密。移液不宜过快,排放应完全。吸头内壁要清洁,一次性使用。
  12.恒温箱温度不足37℃或水浴锅水温度不足37℃)
  放入反应板时注意培养箱温度,及时调整,孵育反应期间开启不宜太多,影响温度平衡。
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