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ELISA试验的关键在哪里?
发布时间:2019-10-21   点击次数:180次
   ELISA试验的关键在哪里?
  优化ELISA的要点之一在于洗刷。洗刷过程可下降未结合抗体所引起的布景信号,从而增加剖析的信噪比。每一步之间的洗刷确保只要特异的结合事情被保存,在后一步产生信号。而不充分的洗刷会导致差异和高布景,从而带来不抱负的成果。本文将为你介绍一些运用主动洗板机来洗刷ELISA平板的技巧。
  洗刷参数
  一些参数会影响洗刷过程的作用。个首要的参数是洗刷量。主动洗板机会分配洗刷液。假如你之前遭遇过高布景,那么不要犹疑,将洗刷量调为高,是比包被体积更高。太少的洗刷液会让一部分剖析外表洗刷不到,从而明显增加布景。所有反应孔的洗刷量有必要相同。一般来说,洗刷量越高,则孵育过程残留的抗体或抗原量就越少。
  洗刷次数的经历法则
  第二个影响洗刷作用的首要参数是洗刷循环的量。当然,洗刷次数越多,布景越低。然而,太多次的洗刷会下降信号强度,使其难以测定。一般的做法是在每次抗体或抗原孵育后重复洗刷三次。
  操控洗刷量和洗刷次数的另一种方法是参加过量的洗刷液。一般来说,96孔板的每个孔能容纳330至460 μl。不过,有些主动化洗板机可设置程序,分配远远超出这个量的洗刷液,比方1 ml。它是怎么做到的呢?其实很简单,就是在分液的一起翻开吸液功用。换句话说,随着分液器分配更多的液体,抽吸器也将液体吸出。这种技术能增加洗刷量,但不会溢出到其他孔中。
  ELISA看起来很简单,但是在实际操作过程中,也不能掉以轻心,还是应该仔细检查洗刷过程,才能获得准确的成果。
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